摘要：法尼基焦磷酸合酶(FPS)是異戊二烯生物合成途徑中的一個(gè)關(guān)鍵酶。為探究FPS在暗紫貝母生物堿合成代謝過程中的作用,本研究利用RT-PCR和RACE技術(shù),克隆了暗紫貝母法基尼焦磷酸合酶基因的全長(zhǎng)cDNA序列,命名為FrFPS,GenBank登錄號(hào)為KX 900485。該序列全長(zhǎng)1333 bp,具有長(zhǎng)度為1059 bp的完整開放閱讀框,編碼352個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)分子量40.13 kDa,等電點(diǎn)pH值為5.17。FrFPS基因的推導(dǎo)氨基酸序列含有高等植物FPS蛋白的典型保守結(jié)構(gòu)域,亞細(xì)胞定位預(yù)測(cè)其在細(xì)胞質(zhì)、線粒體基質(zhì)空間及微體上。系統(tǒng)進(jìn)化分析顯示,暗紫貝母與鐵炮百合處于同一分支,其親緣關(guān)系最近。實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析結(jié)果表明,FrFPS主要在鱗莖表達(dá),且表達(dá)量隨海拔梯度升高而降低,而在莖、葉中表達(dá)量很低。HPLC測(cè)定暗紫貝母鱗莖中生物堿含量,發(fā)現(xiàn)隨海拔梯度升高生物堿含量降低。研究認(rèn)為,FrFPS基因響應(yīng)了對(duì)不同海拔梯度的應(yīng)答。