摘要:目的應(yīng)用RNA干擾技術(shù)抑制人舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株Tca8113中雙泛素(diubiquitin)的表達(dá),探討雙泛素表達(dá)下調(diào)對(duì)舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。方法構(gòu)建針對(duì)雙泛素特異性小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)真核表達(dá)載體pu-雙泛素-siRNA,將其轉(zhuǎn)染至Tca8113細(xì)胞,采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后的Tca8113細(xì)胞中雙泛素的表達(dá)。通過(guò)流式細(xì)胞儀分析siRNA對(duì)舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞周期的影響,并通過(guò)細(xì)胞侵襲能力實(shí)驗(yàn)觀察siRNA對(duì)Tca8113細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的變化。結(jié)果siRNA干擾Tca8113細(xì)胞后,雙泛素的表達(dá)無(wú)論是在mRNA水平還是在蛋白質(zhì)水平均顯著下降[mRNA:實(shí)驗(yàn)組(0.36±0.03)、空白對(duì)照組(0.92±0.07)、空載體組(0.95±0.05);蛋白:實(shí)驗(yàn)組(0.39±0.04)、空白對(duì)照組(0.64±0.05)、空載體組(0.69±0.05)](P〈0.05),細(xì)胞周期被阻滯在G.期,細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,體外侵襲能力下降(P〈0.05)。結(jié)論通過(guò)RNAi技術(shù)阻斷雙泛素的表達(dá),可抑制Tca8113細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、侵襲,提示雙泛素在舌鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起重要作用。
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