摘要：目的基于種屬特異性tlh基因和典型毒力基因(tdh1_368特異性位點(diǎn))建立雙重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(duplex PCR,DPCR)檢測副溶血性弧菌(VP)體系并評價(jià)。方法對建立的DPCR檢測體系,用單盲法評估特異性和靈敏度,用人工模擬樣品、腹瀉標(biāo)本和水產(chǎn)品進(jìn)行現(xiàn)場方法學(xué)評估。結(jié)果該法具有高特異性(100%)和靈敏度(≥1.5 ng/μl),用所建立的方法和培養(yǎng)法平行檢測腹瀉標(biāo)本、市售水產(chǎn)品中的VP,陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,對VP流行株的正確判斷率為93.5%(29/31);對腹瀉標(biāo)本24 h內(nèi)、模擬樣品增菌后4~8 h內(nèi)檢測并報(bào)告VP大流行株。結(jié)論DPCR結(jié)合常規(guī)樣品增菌能加快樣品中VP的檢測和報(bào)告,為及時處理疫情提供技術(shù)支持。