摘要：本研究根據(jù)鼠疫耶爾森氏菌caf1及YPO0392基因,設(shè)計(jì)特異性的引物和不同熒光標(biāo)記的TaqMan熒光探針,構(gòu)建一體系的檢測(cè)體系,對(duì)其敏感性、特異性和穩(wěn)定性進(jìn)行評(píng)價(jià),并對(duì)8份鼠疫陽性及24份陰性DNA樣本進(jìn)行應(yīng)用評(píng)價(jià)。結(jié)果顯示,一體系雙重檢測(cè)鼠疫DNA的敏感度為17.93×10^-5 ng/μL;19份鼠疫菌DNA都有擴(kuò)增,25份非鼠疫菌DNA都未擴(kuò)增;對(duì)8份陽性現(xiàn)場(chǎng)DNA樣本進(jìn)行檢測(cè),一體系檢測(cè)結(jié)果均為陽性;對(duì)24份陰性DNA樣本進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果均為陰性。結(jié)果表明,本研究成功建立了可同時(shí)檢測(cè)鼠疫耶爾森氏菌caf1和YPO0392基因的一體系雙重?zé)晒舛縋CR方法,具有良好的敏感性與特異性,操作方便并節(jié)約成本,能夠代替單基因檢測(cè)方法。