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人CDK14基因表達熒光定量PCR檢測方法的建立及初步應用

摘要:目的 建立一種人細胞周期蛋白依賴性激酶14(CDK14)基因表達熒光定量PCR檢測方法。方法 利用Trizol法提取不同人肺癌細胞株中總RNA,以β-Actin和CDK14分別為內(nèi)參和目的基因,分別設(shè)計特異性擴增引物,建立人CDK14基因表達熒光定量PCR檢測系統(tǒng)并評估其檢測性能。同時將其應用于不同細胞系siRNA干擾前后的CDK14基因相對表達水平檢測。結(jié)果 經(jīng)電泳分析、熔解曲線、產(chǎn)物測序確認人CDK14基因表達熒光定量PCR檢測系統(tǒng)已建立,其特異性良好,重復性佳(CV=7.13%),線性范圍較寬(CDK14與β-Actin分別在Ct值范圍22.47~32.96與15.14~27.55間具有良好的相關(guān)性,r^2=0.9844。)。利用該體系檢測發(fā)現(xiàn):在HCC827 D5和H1650細胞中CDK14基因高表達; 在1~3號干擾片段中,1號片段為有效片段。結(jié)論 人CDK14基因表達熒光定量PCR檢測方法已成功建立。

關(guān)鍵詞:
  • 細胞周期蛋白依賴性激酶14  
  • 基因  
  • 實時熒光定量pcr  
作者:
羅凱; 黎謝夢丹; 石興源; 賈曉婷; 王倩; 鄧敏; 仇秦威; 張志杰; 賀智敏
單位:
廣州醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院/廣州醫(yī)科大學腫瘤研究所; 廣州510095
刊名:
陜西醫(yī)學檢驗

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期刊名稱:陜西醫(yī)學檢驗

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