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人突觸小體相關蛋白25單克隆抗體的制備及初步鑒定

摘要:目的:制備抗人突觸小體相關蛋白25(SNAP25)的鼠源單克隆抗體。方法:利用大腸桿菌表達SNAP25蛋白,純化后免疫BALB/c小鼠制備雜交瘤細胞,篩選針對SNAP25的陽性雜交瘤細胞株,鑒定抗體亞型;用雜交瘤細胞株制備腹水單抗,純化后利用SDS-PAGE檢測抗體純度。結果:表達并純化得到純度大于90%的SNAP25蛋白,免疫小鼠后經2輪篩選得到12株陽性雜交瘤細胞株,其中抗體重鏈包括IgG1、IgG2型,輕鏈大部分為κ鏈;選擇具有相對較高抗原結合活性的14號雜交瘤細胞株制備腹水,純化后得到純度大于90%的抗體。結論:獲得1株高純度的針對SNAP25的鼠源單克隆抗體,為肉毒毒素的檢測奠定了基礎。

關鍵詞:
  • 人突觸小體相關蛋白25  
  • 肉毒毒素  
  • 單克隆抗體  
作者:
孫志杰; 許永亮; 劉凌志; 付楚溪; 熊向華; 畢秀麗; 張惟材
單位:
遼寧大學生命科學院; 遼寧沈陽110036; 軍事醫(yī)學研究院生物工程研究所; 北京100071; 沈陽藥科大學生命科學與生物制藥學院; 遼寧沈陽110016; 沈陽師范大學; 遼寧沈陽110034
刊名:
生物技術通訊

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期刊名稱:生物技術通訊

生物技術通訊雜志由軍事醫(yī)學科學院生物工程研究所主辦,軍事醫(yī)學科學院主管的學術刊物,國內刊號為:11-4226/Q。創(chuàng)辦于1989年,雙月刊,在全國同類期刊中發(fā)行數量名列前茅。其主要欄目有:研究報告、技術方法、綜述、其他等。