摘要：鰓是魚類滲透壓調(diào)節(jié)的主要器官,鰓細胞的培養(yǎng)技術的建立可以為魚類滲透壓調(diào)節(jié)機理研究提供重要的實驗手段和研究方法。金錢魚(Scatophagus argus)作為一種廣鹽性魚類,是研究滲透壓調(diào)節(jié)機制的理想動物模型。本研究采用胰蛋白酶消化法進行了金錢魚鰓細胞的體外培養(yǎng),確定該類細胞原代和傳代培養(yǎng)的最優(yōu)條件,分析了其生長特性。結(jié)果表明,金錢魚鰓細胞系在28℃,含有20%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的L-15培養(yǎng)基中生長最佳,2~4d即可傳代,傳代后可穩(wěn)定培養(yǎng),命名為SG。在傳代培養(yǎng)過程中,對其增殖情況進行分析,發(fā)現(xiàn)SG細胞群體倍增時間為40.8h。正常傳代的SG細胞凍存、復蘇后,經(jīng)臺盼藍染色測得細胞存活率約為87%。鰓細胞直接同水體環(huán)境接觸,具有高效的滲透壓調(diào)節(jié)能力。環(huán)境鹽度變化時,鰓細胞啟動滲透壓脅迫應答機制,維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。本研究對SG細胞進行滲透壓刺激后,檢測其增殖情況并觀察形態(tài)變化。分析表明,SG細胞在分別為150和600mOsmol·kg^–1的低滲和高滲脅迫后均可增殖,且低滲脅迫后的增殖速度是高滲脅迫的1.5倍。滲透壓脅迫后SG細胞的形態(tài)觀察結(jié)果顯示,低滲培養(yǎng)基脅迫后細胞體積發(fā)生膨脹而高滲條件下細胞體積發(fā)生皺縮。由此推斷SG細胞具有較強滲透壓耐受性,且低滲耐受能力強于高滲。SG細胞系的建立為金錢魚滲透壓應答機制和相關基因功能的研究提供了基礎實驗材料。