摘要：目的建立子宮內(nèi)膜異位癥(內(nèi)異癥)患者異位病灶來(lái)源子宮內(nèi)膜干細(xì)胞(En SCs)的分離培養(yǎng)及鑒定方法,并對(duì)所分離細(xì)胞的生物學(xué)特性進(jìn)行檢測(cè),為研究En SCs在內(nèi)異癥發(fā)病機(jī)制中的潛在作用提供支持。方法收集臨床內(nèi)異癥患者異位病灶內(nèi)膜組織樣本,機(jī)械剪碎后Ⅰ型膠原酶消化,分離獲得異位En SCs,常規(guī)培養(yǎng)傳代(n=10);免疫熒光檢測(cè)細(xì)胞波形蛋白(vimentin)的表達(dá)(n=3);MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性(n=5);成脂成骨誘導(dǎo)檢測(cè)細(xì)胞多向分化潛能(n=3),流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)志物(n=3);蛋白芯片檢測(cè)細(xì)胞條件培養(yǎng)基中促血管再生因子及相關(guān)炎癥因子的分泌(n=6),同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞表面相關(guān)黏附分子的表達(dá)(n=7)。結(jié)果成功從異位病灶中分離獲得異位En SCs,所分離細(xì)胞強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)骨架蛋白vimentin,且細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志物CD29、CD73、CD90及CD105,陰性表達(dá)造血干細(xì)胞表面標(biāo)志物CD34和CD45;經(jīng)成脂誘導(dǎo)分化后油紅O染色可見(jiàn)明顯脂滴,成骨誘導(dǎo)分化后茜素紅染色可見(jiàn)明顯鈣結(jié)節(jié);蛋白芯片檢測(cè)結(jié)果表明,異位En SCs能夠分泌高濃度的促血管再生因子血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、血管緊張素(ANG)及血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)-AA,以及與促血管再生密切相關(guān)的炎癥因子白細(xì)胞介素(IL)-6、IL-8和單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1),且細(xì)胞表面高表達(dá)活化白細(xì)胞黏附分子(ACLAM)和細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)。結(jié)論本研究成功建立內(nèi)異癥患者異位病灶來(lái)源En SCs的分離培養(yǎng)及鑒定方法;對(duì)其活性因子分泌的研究表明,異位En SCs具有明顯的促血管再生作用。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果肯定了內(nèi)異癥患者異位病灶中干細(xì)胞的存在,在支持內(nèi)異癥發(fā)病機(jī)制中"干細(xì)胞學(xué)說(shuō)"的同時(shí),為進(jìn)一步圍繞異位En SCs開(kāi)發(fā)潛在的內(nèi)異癥治療靶點(diǎn)提供可能。