摘要:本研究采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù),將CmTreⅡ(膜結(jié)合型海藻糖酶基因一個(gè)靶位點(diǎn))導(dǎo)入粳稻中花11號中,利用CmTreⅡ-dsRNA(含有膜結(jié)合型海藻糖酶基因一個(gè)靶位點(diǎn)的雙鏈RNA)的沉默效應(yīng),沉默稻縱卷葉螟的膜結(jié)合型海藻糖酶,最終獲得一批抗蟲性較好的轉(zhuǎn)基因純合株系。研究中進(jìn)一步檢測了這些株系的室外卷葉率、白葉率以及室內(nèi)抗蟲性。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-q PCR)檢測轉(zhuǎn)基因水稻室內(nèi)抗蟲性CmTre2基因的相對表達(dá)量。通過RT-PCR技術(shù)檢測了轉(zhuǎn)CmTreⅡ基因水稻的遺傳性。結(jié)果顯示:在室外抗蟲性試驗(yàn)中,稻縱卷葉螟對水稻的取食量明顯下降,轉(zhuǎn)CmTreⅡ基因水稻的卷葉率和白葉率分別為13.40%和12.47%,相比對照組分別下降了11.32%和10.10%;在室內(nèi)抗蟲性試驗(yàn)中,RT-q PCR檢測結(jié)果表明,稻縱卷葉螟在取食轉(zhuǎn)CmTreⅡ基因水稻的96 h后,CmTre2基因的相對表達(dá)量比對照組下降了29.00%;7 d后,實(shí)驗(yàn)組的死亡率為56.67%,相比對照組增加了46.67%。在遺傳性試驗(yàn)中,檢測發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)CmTreⅡ基因水稻的遺傳性良好。因此本研究成功鑒定了轉(zhuǎn)CmTreⅡ基因水稻對稻縱卷葉螟的抗蟲性以及遺傳性。
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