摘要：以鯉春病毒血癥病毒(Spring Virernia of Carp Virus,SVCV)shlj1分離株基因組RNA為模板,利用RT-PCR擴(kuò)增獲得SVCV糖蛋白(Glycoprotein,G)部分基因序列(420 bp),克隆至pET-32a原核表達(dá)載體,構(gòu)建重組質(zhì)粒pET-32a-G;將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌Rosetta表達(dá)菌株,利用SDS-聚丙烯酰氨凝膠電泳(SDS-PAGE)對(duì)截短G蛋白的表達(dá)及純化情況進(jìn)行檢測(cè);將純化的G蛋白免疫小鼠制備鼠抗血清,采用酶聯(lián)免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和細(xì)胞間接免疫熒光抗體試驗(yàn)(Indirect fluorescent antibody test,IFAT)對(duì)抗血清進(jìn)行鑒定。SDS-PAGE結(jié)果顯示該重組截短G蛋白與預(yù)期大小相符(約為35 kDa),以包涵體的形式表達(dá);ELISA結(jié)果顯示,制備的鼠抗截短G蛋白血清效價(jià)為1∶80 000;IFAT結(jié)果顯示,抗血清能夠識(shí)別不同地區(qū)的SVCV分離株(黑龍江省3株,遼寧省2株),在FITC標(biāo)記的羊抗鼠IgG作用下,呈特異性綠色熒光。結(jié)果表明,制備的截短SVCV G蛋白具有良好的免疫原性,利用其所制備的抗體能夠識(shí)別我國(guó)不同SVCV分離株病毒表面天然結(jié)構(gòu)的糖蛋白。