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輪狀病毒結(jié)構(gòu)蛋白VP4在家蠶桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)

摘要:輪狀病毒(rotavirus,RV)是引起全球嬰幼兒及幼畜非細(xì)菌性胃腸炎的主要病原體之一,VP4蛋白是輪狀病毒的主要中和抗原。利用載體RD-BmBacmid與重組載體pBacPAK8-VP4共轉(zhuǎn)染家蠶細(xì)胞BmN獲得重組家蠶桿狀病毒BmNPV-VP4,并用該病毒感染BmN細(xì)胞及家蠶5齡幼蟲(chóng),從而在BmN細(xì)胞及家蠶中表達(dá)TB-Chen株輪狀病毒的VP4蛋白。Western blotting檢測(cè)到BmN細(xì)胞及家蠶幼蟲(chóng)血淋巴中均出現(xiàn)88 kD的特異性條帶,證明VP4蛋白在BmN細(xì)胞和家蠶中獲得了表達(dá)。ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示,VP4蛋白在BmN細(xì)胞和家蠶幼蟲(chóng)血淋巴中的表達(dá)分別在感染后4 d和6 d達(dá)到最高水平,每個(gè)細(xì)胞和每mL血淋巴中的表達(dá)量分別為4.28 pg和1.61μg。研究結(jié)果為輪狀病毒口服疫苗的研制奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞:
  • 輪狀病毒  
  • vp4蛋白  
  • 家蠶桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)  
作者:
靳洋洋; 陳貝妮; 李司
單位:
浙江理工大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生物化學(xué)研究所; 浙江省家蠶生物反應(yīng)器和生物醫(yī)藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 杭州310018
刊名:
蠶業(yè)科學(xué)

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期刊名稱(chēng):蠶業(yè)科學(xué)

蠶業(yè)科學(xué)雜志緊跟學(xué)術(shù)前沿,緊貼讀者,國(guó)內(nèi)刊號(hào)為:32-1115/S。堅(jiān)持指導(dǎo)性與實(shí)用性相結(jié)合的原則,創(chuàng)辦于1963年,雜志在全國(guó)同類(lèi)期刊中發(fā)行數(shù)量名列前茅。